普通干型透析袋

產(chǎn)地：

美國(guó)聯(lián)合碳化公司Viskase

基本原理：

生物樣品的透析只需使用專用的半透膜即可完成。通常是將半透膜制成袋狀，將生物大分子樣品溶液置入袋內(nèi)，浸入水或緩沖液中，樣品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋內(nèi)，而鹽和小分子等物質(zhì)不斷擴(kuò)散透析到袋外，直到袋內(nèi)、外兩邊的濃度達(dá)到平衡。保留在透析袋內(nèi)未透析出的樣品溶液稱為“保留液"，袋（膜）外的溶液稱為“滲出液"或“透析液"。

透析袋的選擇：

目前市場(chǎng)上提供透析袋的品牌主要來(lái)自聯(lián)合碳化Viskase的普通干型透析袋和美國(guó)光譜醫(yī)學(xué)公司Spectrum的（再生）纖維素透析袋。前者為10%甘油涂層，透析袋中含有微量的硫化物、重金屬和一些具紫外吸收的雜質(zhì)，對(duì)蛋白質(zhì)和其他生物活性物質(zhì)有害，使用前需經(jīng)過(guò)特定處理去除這些物質(zhì)后才能使用；后者為生物技術(shù)膜，生產(chǎn)過(guò)程中無(wú)重金屬及硫化物污染，無(wú)需預(yù)處理，屬于即用型的透析袋。

除了從便捷性和經(jīng)濟(jì)性上來(lái)考慮（是否需要處理，以及成本高低），在透析袋的選擇上必須要考慮以下幾個(gè)重要參數(shù)：

1）選擇合適的截留分子量（Molecular weight cutoff，MWCO）

概念：對(duì)有孔材料孔徑大小的一種描述。在能自由通過(guò)某種有孔材料的分子中最大分子的分子量即為該材料的截留分子量。大于截留分子量的分子，被材料截留；小于截留分子量的分子，則可自由通過(guò)。截留分子量是凝膠過(guò)濾介質(zhì)、半透膜、超濾膜等材料的重要技術(shù)參數(shù)。

截留分子量的選擇是以預(yù)留在膜內(nèi)的大分子的分子量和將要被除去的小分子污染物的分子量為基礎(chǔ)的。為達(dá)到合理有效的分離，需分離的兩種物質(zhì)分子量的比率至少為25。

選擇截留分子量的經(jīng)驗(yàn)法則：選擇截留分子量值約為要保留的大分子分子量的一半，以獲得至少90%的保留率。

2）正確選擇扁平寬度

透析袋扁平寬度的選擇取決于樣品體積和透析容量。較小的透析管透析更快；較大的透析管因擴(kuò)散距離較長(zhǎng)透析較慢。為易于使用，建議使用總長(zhǎng)（包括閉合夾和頂部空間）為大約10-15cm的透析袋。

3）透析袋的化學(xué)相容性

化學(xué)相容性主要用作使用指導(dǎo)，不作為化學(xué)相容的保證。溫度，濃度，長(zhǎng)時(shí)間曝光等因素的改變可能影響產(chǎn)品的使用。建議自設(shè)條件進(jìn)行測(cè)試。

普通干型透析袋的技術(shù)參數(shù)：

△pH穩(wěn)定范圍 ：5-9

△污染物水平:：硫化物<0.3%;；重金屬<50ppm；

△化學(xué)兼容性: 與很多鹽兼容，比如CaCl₂, (NH₄)₂SO₄；還可與分子生物學(xué)及酶學(xué)中常用的水溶劑、有機(jī)溶劑兼容，比如異丙醇、乙醇和丙酮。

△溫度抵抗性：可煮沸，可高壓滅菌。

△蛋白吸附： 每g透析袋吸附蛋白量小于1ng。

普通干型透析袋的儲(chǔ)存方法：

10-29℃保存，每次使用后將余下的膜放回袋子并密封好，以防干裂。

普通干型透析袋使用前處理方法:

1. 把透析袋剪成適當(dāng)長(zhǎng)度（10-20cm左右）的小段。

2. 在大體積2%（w/v）碳suan氫鈉和1mM EDTA（pH 8.0）中將透析袋煮沸10min。

3. 取出用蒸餾水徹di清洗透析袋。

4.在大體積的1mM EDTA（pH 8.0）中將透析袋煮沸10min。

5.冷卻后存放于4℃保存，應(yīng)確保透析袋始終浸沒(méi)于溶液中。此時(shí)起取用透析袋必須戴手套。

【注意】：實(shí)驗(yàn)要求不高的話，可以用簡(jiǎn)易處理方法：在沸水中煮10min，再用蒸餾水洗凈，即可使用。

6. 使用前，須將透析袋用蒸餾水里外加以去清洗，沖洗三次即可。

產(chǎn)品信息：

普通干型透析袋的使用后保存方法：

使用后的透析袋洗凈后浸泡于蒸餾水或者30%乙醇中，確保透析袋始終浸沒(méi)在溶液內(nèi)，4℃保存。若長(zhǎng)時(shí)間不用，可加少量NaN₃，以防長(zhǎng)菌。此時(shí)起取用透析袋必須戴手套。洗凈晾干的透析袋彎折時(shí)易裂口，用時(shí)必須仔細(xì)檢查，不漏時(shí)方可重復(fù)使用。

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— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

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