SYBR Green I (10,000× in DMSO) 核酸凝膠染料

產(chǎn)品標簽

GoldView；Acridine Orange 吖啶橙；GelRed；DuRed；GelGreen；溴化乙錠（EB）；SYBR Green I；

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

SYBR Green I，是目前檢測瓊脂糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠中dsDNAzui靈敏的染料之一，zui低檢出限為20pg DNA（254nm紫外發(fā)射光），60pg DNA（300nm透射光）；還可用于寡核苷酸檢測（1-2ng，300nm透射光），比溴化乙錠EB的靈敏度高50-100倍。

SYBR Green I檢測凝膠中核酸的非凡靈敏度歸因其*的染料特性：①SYBR Green I具有*的DNA結(jié)合力，與DNA結(jié)合后熒光顯著增強—至少比EB高出一個數(shù)量級；②DNA/SYBR Green I復合物的熒光量子產(chǎn)率（~0.8）比DNA/EB（~0.15）高5倍多；③SYBR Green I在瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠中迅速滲透，在缺乏DNA時背景熒光可忽略，讓染色步驟快速，且成像之前無需脫色。

SYBR Green I因與DNA結(jié)合能力強，既能在電泳前（預染），也能在電泳后（后染）對DNA進行染色。還可對毛細管電泳分離的DNA進行染色。SYBR Green I與DNA的結(jié)合不會抑制多種常見的限制性內(nèi)切酶活性，包括Hind III和EcoR I，可直接進行消化或連接。用于瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA后，還可直接將DNA轉(zhuǎn)移到膜上，進行后續(xù)的核酸印跡雜交分析。

本品為溶于DMSO 的10,000×的SYBR Green I核酸染料。

注意事項

1. 獨立實驗室進行的艾姆斯試驗表明SYBR Green I 的致突變性明顯比EB要低很多。但是，必須警告用戶注意，目前尚無關(guān)于SYBR Green I 對人體的致突變性或毒性的數(shù)據(jù)。由于該染料與核酸結(jié)合，應(yīng)當被看作潛在誘變劑，使用時要小心謹慎。在處理DMSO儲存液時應(yīng)特別小心，因DMSO能促進有機分子進入組織。染料的廢棄處理應(yīng)當符合當?shù)氐囊?guī)定。
2. SYBR Green I對dsDNA的檢測靈敏度非常高（20pg，254nm紫外發(fā)射光），但對ssDNA和RNA的靈敏度稍低（100-300pg，254nm紫外發(fā)射光），使之成為復雜溶液中檢測dsDNA的理想選擇。尤其是復雜溶液中的ssDNA和RNA可能會掩蓋結(jié)果的時候，如凋亡*的連續(xù)梯度條帶apoptosis ladders。
3. SYBR Green I的zui大激發(fā)波長為497nm，但在～290nm和～380nm處有二級激發(fā)峰。與DNA結(jié)合的SYBR Green I的熒光發(fā)射集中在520nm。這些光譜特性讓SYBR Green I適用于多種凝膠檢測儀，從紫外反射（上紫外）和透射儀（下紫外）到氬離子激光器和水銀燈激發(fā)的凝膠掃描儀。
4. 預染色方法，電泳時間不要超過2h，否則SYBR Green I會從DNA上脫離出來，產(chǎn)生彌散狀條帶。
5. 紫外照射透shi下，與dsDNA結(jié)合的SYBR Green I呈綠色熒光。如果膠中含ssDNA，則熒光顏色為橘黃色而不是綠色。
6. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用方法【詳見懋康整理】

一、使用前準備工作

二、 染色方法

1．電泳后的DNA染色（后染）

2．電泳前的DNA染色（預染）

三、 凝膠成像（紫外或藍光透射儀或紫外頂置光源直射）

四、從dsDNA中去除SYBR Green I

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

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SYBR Green I (10,000×) 核酸凝膠染料

SYBR Green I (10,000×) 核酸凝膠染料

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