D-Luciferin熒光素鉀鹽 熒光探針與細胞染色
簡要描述：
D-Luciferin熒光素鉀鹽 熒光探針與細胞染色是熒光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍用于整個生物技術領域，特別是體內活體成像技術。作用機制是在ATP和熒光素酶的作用下，D-熒光素（底物）被氧化發(fā)光。當熒光素過量時，產生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關性。
產品時間：2025-07-03
打印當前頁Luc 報告基因底物/ D-Luciferin D-螢火蟲熒光素鉀鹽
活體成像研究/體外生物發(fā)光研究/轉錄水平研究（金標產品，享發(fā)文獎勵）《促xiao中》
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搜索關鍵詞：
Luc reporter gene 報告基因；In vivo imaging 活體成像研究；轉錄水平研究；熒光素酶/ATP水平研究；報告基因質粒；報告基因病毒顆粒；螢火蟲熒光素；甲蟲熒光素；CAS：115144-35-9；
基本描述：
D-熒光素（D-Luciferin）是熒光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍用于整個生物技術領域，特別是體內活體成像技術。作用機制是在ATP和熒光素酶的作用下，D-熒光素（底物）被氧化發(fā)光。當熒光素過量時，產生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關性（見下圖）。將攜帶熒光素酶編碼基因（Luc）的質粒轉染進入細胞后，導入研究動物如大小鼠體內，之后注入熒光素，通過生物發(fā)光成像技術（BLI）來檢測光強度變化，從而實時監(jiān)測疾病發(fā)展狀態(tài)或藥物的治療功效等。也可以利用ATP對此反應體系的影響，根據(jù)生物發(fā)光強度的變化來指示能量或生命體征。
基本應用：
D-熒光素也常用于體外研究，包括熒光素酶和ATP水平分析；報告基因分析；高通量測序和各種污染檢測。
常見商業(yè)化類型的差異（熒光素鉀，鈉，游離酸）：
目前市場上有三種產品形式，D-熒光素（游離酸），D-熒光素（鈉鹽），和D-熒光素（鉀鹽）。這三種產品主要差別在于溶解特性。
1）D-熒光素（游離酸）在水以及緩沖體系內的溶解性都很弱，除非溶于弱堿如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇（10 mg/ml）和DMSO（50 mg/ml）。
2）D-熒光素（鈉鹽）和D-熒光素（鉀鹽）能夠非常容易且快速的溶入水或者緩沖液中，使用方便，溶劑無毒性，特別適合體內實驗。配成溶液后的三種產品，在絕大多數(shù)應用上都沒有實質性的差別。
3）D-熒光素（鈉鹽）和D-熒光素（鉀鹽）基本上沒有差別，主要是使用習慣等因素影響。整體來看，鉀鹽的應用文獻明顯多于鈉鹽。
D-熒光素鉀鹽基本特性：
1）CAS NO：115144-35-9
2）化學名：4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid potassium salt,D-Luciferin firefly, potassium salt
3）分子式：C11H7N2O3S2K
4）分子量：318.42 g/mol
5）純度：＞99% (HPLC)，分子生物學級（超純）
6）外觀：淺黃色至黃色粉末
7）溶解性：溶于水（60 mg/ml）
使用方法：
A．體外生物發(fā)光檢測
1）儲存液制備
用蒸餾水溶解D-熒光素（鉀鹽），配制成15mg/ml的儲存液（100×），混勻后立即使用或分裝于-20℃或-80℃凍存，避免反復凍融。建議使用的工作液濃度為150µg/ml（相當于468µM）。
2）熒光素酶反應緩沖液制備
配方【1×，參考Yuichi Oba, et al., 2003】：100mM Tris-HCl（pH 7.8），5mM MgCl2，250µM CoA，150µM ATP。具體緩沖液組成可參考其他文獻資料來調整。按照以上配方制備熒光素酶反應緩沖液（2×）。
3）收集細胞裂解上清（熒光素酶表達）
根據(jù)需要檢測的細胞類型，選擇合適的裂解液進行細胞裂解，離心收集上清后續(xù)檢測待用。
4）螢火蟲熒光信號檢測
【注①】：螢火蟲熒光信號的檢測方法大體上取決于冷光測定儀（luminometer）類型（是手動型熒光計、單管注射型或者酶標板讀數(shù)型熒光計）。根據(jù)特定發(fā)光測定儀，來考慮注射用量和程序設置。
【注②】：需設置不含熒光素酶的孔（用作陰性對照），以測定背景熒光。
例：注射式冷光測定儀（injectible luminometer，單樣或微孔板，200µl終體積）
a）吸取100µl熒光素酶反應緩沖液（2×）到一干凈的冷光測定儀比色皿或96孔板的各孔（最好使用全白平底的96孔板）；
b）吸取50~98µl裂解上清到皿或孔內；
c） 如果有需要，用水來補足使得總體積到198µl；
d）設置程序注射2µl熒光素儲存液（使工作濃度150µg/ml），程序：2~5秒延遲（delay），之后10s測定。
B．活體成像分析
1）用無菌的PBS（w/o Mg2+）或者DPBS（w/o Mg2+）配制D-熒光素（鉀鹽）工作液（15mg/ml），0.2µm濾膜過濾除菌。混勻后立即使用或分裝于-20℃或-80℃凍存，避免反復凍融。一旦使用，放到4℃解凍，保持冰冷且避光。
2）注射量取決于注射方式，具體如下：
注射方式 | 劑量 |
靜脈注射（25-27 gauge針頭） | 按10µl/g體重濃度，加入相應體積的15mg/ml熒光素工作液 |
腹腔注射（25-27 gauge針頭） | 按10µl/g體重濃度，加入相應體積的15mg/ml熒光素工作液 |
肌肉注射（27 gauge針頭） | 50µl，濃度為1-2mg/ml熒光素工作液 |
鼻內注射（pipette） | 50µl，濃度為3mg/ml熒光素工作液 |
3）注射入體內10-20 min（待光信號達到最qiang 穩(wěn)定平臺期），再進行成像分析。
注：建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學曲線，從而確定最高信號檢測時間和信號平臺期。
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貨號 | 產品名稱 | 規(guī)格 | 價格（元） | 促xiao價 | 貨期 |
MX4603-100MG | D-Luciferin, Potassium Salt D-熒光素（鉀鹽） | 100mg | 998 | 898 | 現(xiàn)貨 |
MX4603-500MG | D-Luciferin, Potassium Salt D-熒光素（鉀鹽） | 500mg | 2500 | 2248 | 現(xiàn)貨 |
MX4603-1G | D-Luciferin, Potassium Salt D-熒光素（鉀鹽） | 1g | 4500 | 3788 | 現(xiàn)貨 |
MX4603-5G | D-Luciferin, Potassium Salt D-熒光素（鉀鹽） | 5×1g | 20200 | 17500 | 現(xiàn)貨 |
MX4603-10G | D-Luciferin, Potassium Salt D-熒光素（鉀鹽） | 10×1g | 36400 | 34000 | 現(xiàn)貨 |
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貨號 | 產品名稱 | 規(guī)格 | 貨期 |
MX4602-100MG | D-Luciferin, Sodium Salt D-熒光素（鈉鹽） | 100mg | 現(xiàn)貨 |
MX4602-500MG | D-Luciferin, Sodium Salt D-熒光素（鈉鹽） | 500mg | 現(xiàn)貨 |
MX4601-250MG | D-Luciferin Firefly, Free Acid D-螢火蟲熒光素（游離酸） | 250mg | 現(xiàn)貨 |
MX4604-10MG | DMNPE-caged Luciferin D-熒光素（DMNPE籠閉） | 10mg | 現(xiàn)貨 |
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