溶酶體熒光探針（Probes for Lysosomes）專題
搜索關鍵詞：
溶酶體（Lysosome）；Acidic Organelle 酸性細胞器；MitoTracker；MitoSOX；LysoTracker；LysoSensor；溶酶體貯積癥（Lysosome Storage Diseases，LSDs）
基本介紹：
溶酶體（Lysosome）又稱為溶質體，是由單層膜圍成的球狀體，主要化學成分為脂類和蛋白質。溶酶體內富含幾十種酸性水解酶，包括蛋白酶、核酸酶、磷酸酶、糖苷酶、脂肪酶、磷酸酯酶及硫酸酯酶等，能夠控制多種內源性和外源性大分子物質的消化。因此，溶酶體具有溶解或消化功能，是物質代謝的場所。
溶酶體結構和功能異常引起的疾病稱為溶酶體病。常見的有溶酶體相關的遺傳性疾病，致病機理在于酸性水解酶合成基因突變引起酶合成障礙，造成溶酶體酶缺乏，從而致使相應酶代謝底物不能降解而積蓄在溶酶體中，造成細胞代謝障礙，形成溶酶體貯積癥。溶酶體異常還與休克、類風濕關節炎、腫瘤等疾病發生有關聯。
溶酶體系列探針：
一、LysoTracker Probes（酸性細胞器選擇性的細胞膜滲透性探針）
1、傳統溶酶體探針的缺點：
弱堿性胺類選擇性聚積在低pH的細胞區室（cellular compartments），可用來研究溶酶體的生物合成和發病機制。zui常用的一種酸性細胞器探針為DAMP，本身無熒光，需要與抗DNP抗體聯合使用，并直接或間接偶聯到熒光素或酶上，從而可視化觀察染色特征。熒光探針中性紅和吖啶橙也常用來染酸性細胞器，即使無染色特異性。
2、LysoTracker溶酶體探針的優點
正是以上缺點促使我們開發替代性的酸性細胞器選擇性探針，用于短期和長期示蹤研究。
Lysotracker探針是向酸性熒光探針，用于活細胞內酸性細胞器的標記和示蹤。這些探針具有幾個重要特征，包括高度選擇靶向酸性細胞器和納摩爾濃度有效標記活細胞。另外，LysoTracker系列有幾種熒光顏色，特別適合用于多色標記實驗。
Lysotracker探針，含一連接到弱堿基上的熒光素，中性pH下呈部分質子化，能夠自由穿透細胞膜且典型聚集在球形細胞器上。研究發現，Lysotracker探針必須在極低濃度（通常約50nM）下才能獲得優異的選擇性。這些探針的滯留（retention）機制雖然沒有被*研究透，但很可能與酸性細胞器的質子化和滯留性有關，即使后續的弱堿性細胞滲透化合物處理細胞通常不會可逆化染色結果。Lysotracker探針的內吞化動力學研究顯示染料進入活細胞的攝入速率僅幾秒即可。然而，這些溶酶體探針會導致溶酶體被堿化，比如長期孵育會誘使溶酶體pH的增加。因此，建議成像前用探針孵育細胞的時間僅1-5min就好。
3、LysoTracker溶酶體探針產品
我們提供5種Lysotracker探針，它們在光譜特性和使用特點上有所差異，具體見下表。
貨號 | 產品名稱 | Ex/Em(nm) | 規格 | 價格（元） |
L7525 | LysoTracker Blue DND-22 藍色 | 373/422 | 20 x 50 µL | 4,298.00 |
L7526 | LysoTracker Green DND-26 綠色 | 504/511 | 20 x 50 µL | 4,319.00 |
L12491 | LysoTracker® Yellow-HCK-123 黃色 | 465/535 | 20 x 50 µL | 4,267.00 |
L7528 | LysoTracker® Red DND-99 紅色 | 577/590 | 20 x 50 µL | 4,268.00 |
L12492 | LysoTracker® Deep Red 遠紅 | 647/668 | 5 x 50 µL | 3,215.00 |
以上所有產品均為Life（Invitrogen）原裝，原始包裝為20x50 µl（20支50µl單個包裝構成）或5x50 µl（5支50µl單個包裝構成）。我司對L7526，L7528進行拆開銷售，特惠價為380元/支，單支50µl，現貨銷售，歡迎訂購。
二、LysoSensor Probes（酸性細胞器選擇性的pH指示劑）
1、產品描述
為滿足研究者研究活細胞內溶酶體生成和功能的動力學特征，特此開發Lysosensor系列探針。
LysoSensor探針是一種區分酸性細胞器的熒光pH指示劑。該系列染料屬于向酸性探針，能夠聚集在呈質子化的酸性細胞器上。這一質子化過程使得因弱堿性側鏈而封閉熒光的探針得以熒光釋放，促使熒光信號增強。因此，LysoSensor探針遇酸后熒光信號呈現pH依賴性的增強。
2、 LysoSensor溶酶體探針產品
我們提供3種Lysosensor探針，它們在光譜特性和使用特點上有所差異，具體見下表。
貨號 | 產品名稱 | Ex/Em(nm) | pKa | 規格 | 價格（元） |
L7533 | LysoSensor Blue DND-167 藍色 | 373/425 | 5.1 | 20 x 50 µL | 4,174.00 |
L7535 | LysoSensor Green DND-189 綠色 | 443/505 | 5.2 | 20 x 50 µL | 4,225.00 |
L7545 | LysoSensor Yellow/Blue DND-160 藍/黃色 | 384/540, 329/440 | 4.2 | 20 x 50 µL | 4,211.00 |
以上所有產品均為Life（Invitrogen）原裝，原始包裝為20x50 µl（20支50µl單個包裝構成）。我司對L7545進行拆開銷售，特惠價為550元/支，單支50µl，現貨銷售，歡迎訂購。
— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
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